כרומטוגרפיה בשכבה דקה: שיטות פשוטות לניתוח מורכב

2024 מְחַבֵּר: Howard Calhoun | [email protected]. שונה לאחרונה: 2023-12-17 10:27

כרומטוגרפיה בשכבה דקה תופסת עמדה מובילה בניתוח כמותי וחצי כמותי של חומרים פרמצבטיים מורכבים, טבעיים, ביו-רפואיים, טכנולוגיים, כימיים ועוד רבים אחרים. כרומטוגרפיית שכבה דקה היא גם השיטה הנגישה ביותר לניתוח מסה של כמעט כל סוג של חומרים.

שיטה זו של הפרדה וניתוח של מערכות מרובות רכיבים נמצאת בשימוש נרחב במעבדות עם פרטים וכיוונים שונים: סניטריים ואפידמיולוגיים, וטרינרים, אגרוכימיים, מחקרים, משפטיים, וכן בתחנות להגנת הצומח, במרכזי תקינה ובלשכות של מומחיות רפואית משפטית.

היתרונות העיקריים של כרומטוגרפיה בשכבה דקה המבוססת על תנועת ה-eluent (הממס של האנליט) בשכבת הסופג עקב מה שנקרא כוחות נימיים,הם הפשטות והקלות של התהליך הכרומטוגרפי, מידת הדיוק הגבוהה של הניתוח והעלות הנמוכה יחסית של הציוד הדרוש.

כרומטוגרפיה בשכבה דקה, בעלת דרגת רגישות גבוהה (סף זיהוי נמוך) וסלקטיביות, מאפשרת לקבוע 10-20 מיקרוגרם של חומרים בדיוק של עד 7%, המהווה אינדיקטור גבוה מאוד. כרומטוגרפיה בשכבה דקה יכולה להיות מסוגי ספיחה והפצה. האפשרות הראשונה היא הנפוצה ביותר.

מהות שיטת הכרומטוגרפיה השכבה הדקה היא תנועת הממס של החומר בשכבת הסופג והפיזור המרחבי של רכיבים שונים בהתאם למאפיינים האישיים ולתכונותיהם. העובדה היא שמולקולות בעלות הרכב ומבנה שונים נספגות (מופקדות) על פני השטח המוצקים של צלחת כרומטוגרפית בדרכים שונות. לכן, מערכות מורכבות מרובות רכיבים מחולקות בהדרגה לרכיבים נפרדים.

נעים במהירויות שונות לאורך שכבת הספיגה, רכיבים נפרדים, כבר מופרדים, יוצרים כרומטוגרמה. כל כתם צבע מתאים לכימיקל מסוים. במקביל, מוארים חומרים חסרי צבע באור אולטרה סגול, שבהשפעתו מתחילות להאיר תרכובות רבות, או שהם מטופלים עם מגיב צביעה מיוחד.

בין השיטות האנליטיות המודרניות, בולטת כרומטוגרפיית גז-נוזל. שיטת הפרדה וניתוח זומאופיין בשימוש בנוזל מיוחד שאינו נדיף כחומר סופג, אשר מרטיב את החומר הקרמי האבקתי. וגזים אינרטיים שונים משמשים כאן כאמצעי מניע. שיטה זו יעילה ביותר לחקר תערובות מורכבות המכילות מאות רכיבים שונים.

שיטה מודרנית נוספת לחקר ההרכב של חומרים מורכבים היא כרומטוגרפיה נוזלית. המאפיין העיקרי של שיטה זו הוא הפרדה של רכיבים בודדים באמצעות הבדלים בהתפלגותם בין השלב הנייד (הפלט) והנייח (הסופח). שיטה זו משמשת לרוב בניתוח תרכובות אורגניות שונות (תוספי מזון, חומרי הדברה, רעלים שונים וכו'). כמו כן, שיטה זו של מחקר כרומטוגרפי משמשת לבקרת איכות התכשירים התרופתיים, קביעת תכולת הסטרואידים בנוזלים ביולוגיים, ניתוח חומצות אמינו ודברים נוספים.